原理:
三代测序是一种对高级测序技术的进一步改进,通过将转录测序和反向半完全测序相结合来实现准确的基因配对,从而实现比先代更精准的基因组测序。
步骤:
1.提取和处理样本:将样本切口采集后,经过提取、洗涤和处理后,可获得几千到几千万个核苷酸序列。
2.碱基特异性扩增:按照碱基的特异性做物理化学的处理,将探针结合在碱基处,形成特定序列的DNA片段(amplicon),从而把单个微量DNA放大上百万倍。
3.建立反向半完全数据库:利用生物信息学的技术将amplicon的序列解析出来,建立反向半完全序列,记录每个gene的位置。
4.完成对gene对配对:对amplicon序列比对到反向半完全数据库,从而完成对gene对配对,实现准确的基因组测序。